文章摘要:本研究旨在建立牛支原体Taqman探针实时荧光定量PCR方法，便于临床上快速检测、诊断牛支原体病。本研究根据牛支原体TU基因（登录号：CP002188.1）设计合成特异性引物及Taqman探针，并通过试验检验所建立检测方法的特异性和灵敏性。本研究所建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线的截距为46.20，斜率为－3.24，相关系数为－0.996，提示标准品的浓度与C_t值呈线性关系。方法性能评价显示，所建方法组内及组间重复性变异系数均低于0.02，说明所建方法的重复性好；灵敏性试验中，目的基因最小检出浓度为19.1 copies/μL，敏感性是常规PCR(1.91×10⁴ copies/μL)的1 000倍。试验结果表明，本研究建立的牛支原体荧光定量PCR方法，具有精确、敏感、特异等优点，可为临床上快速检测牛支原体病提供技术支撑。

文章关键词:牛支原体,TU基因,Taqman探针,荧光定量PCR,

项目基金:贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2015]2082号),贵州省科学技术项目(黔科合基础[2019]1181号),